westernblot显色方法有哪=几=种
western blot显色方法有哪几种 -
有很多种显示方法，其中HRP、化学发光检测（ECL、SuperSignal）居多，DAB显色很少见。主要分为两大类，分别介绍如下：化学发光Chemiluminescent：随着各大厂家努力开发研制灵敏度更高的发光底物，化学发光法的灵敏度已经达到pg级别，甚至还有Femto级别的，灵敏度超过了同位素；底物显色Colormetirc/Chromogen：直等会说。
Western Blot显色的方法主要有以下几种：i.放射自显影ii.底物化学发光ECL iii.底物荧光ECF iv.底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，目前发表文章通常是用底物化学发光ECL.只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理如下（二抗用HRP标记）：反后面会介绍。
有很多种显示方法，其中HRP、化学发光检测（ECL、SuperSignal）居多，DAB显色很少见。主要分为两大类，分别介绍如下：化学发光Chemiluminescent：随着各大厂家努力开发研制灵敏度更高的发光底物，化学发光法的灵敏度已经达到pg级别，甚至还有Femto级别的，灵敏度超过了同位素；底物显色Colormetirc/Chromogen：直等会说。
Western Blot显色的方法主要有以下几种：i.放射自显影ii.底物化学发光ECL iii.底物荧光ECF iv.底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，目前发表文章通常是用底物化学发光ECL.只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理如下（二抗用HRP标记）：反后面会介绍。
蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot。它是？>分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。蛋白质印迹法是由瑞士米歇尔弗雷德等会说。
未染色的Marker在做Western时，需要在印迹前先用丽春红或者是SYPRO荧光蛋白染色液等不干扰Western Blot的染色方法显色，在胶上做标记最后才能“拼”在最后的结果中，如果是预染的Marker就要在转膜后标记膜，或者剪膜，最后在“拼上”。要是想直接将Marker结果显示在最后结果上，不用手工作图或者拼接，那还有呢？
western blot用第一抗体直接酶标显色可以吗 -
理论上是可以的只要对你的一抗信号足够强。。使用二抗乃至三抗的主要目的就是放大信号。
Phosphate buffered saline (PBS): 10 mM sodium phosphate, pH 7.2, 0.9% (w/v) NaCl 在网上很容易找到相应的信息，在50-65C孵育一段时间来实现剥脱。不过由于有SDS，很可能会造成部分抗原的剥脱。通常用化学发光的很好剥，用显色的就比较困难了，荧光的也不太好剥。如果担心自己配的不稳定希望你能满意。
急切求解WB,IHC的意思! -
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。
少年，western blot 最后放大的方法有很多很多，从你的叙述上来看，“在底片上有明显的显影”，就是底片显影，那我们就只说说这个哈。首先，聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白会固定到醋酸纤维膜上，然后加上该蛋白的一抗。如果蛋白表面只有一个一抗结合位点，那么就结合一个一抗，也就没什么；如果蛋白表面有多个到此结束了？。
western blot 实验中不显色 -
是不是转过了啊？marker跑过去可以留下颜色可是蛋白已经不在了，所以就算有marker你的目的蛋白也会不在了的，试试跑的时间短点吧，还有啊，你的电流多大的？也可以调调试试，
没有条带的原因很多：可能没封闭好，一抗是不是回收次数太多了，二抗不好用，TBST长毛了，等等。这个还有做外包的呀，我们这边实验室western是最普遍的实验了。